ПЦР (полимеразная цепная реакция) – на сегодняшний день самый быстрый и достоверный метод диагностики инфекционных заболеваний. Метод ПЦР применяется в диагностике острых кишечных инфекций для выявления и дифференциации ДНК (РНК) микроорганизмов рода Шигелла (Shigella spp.) и энтероинвазивных E. coli (EIEC), Сальмонелла (Salmonella spp.) и термофильных Кампилобактерий (Campylobacter spp.), аденовирусов группы F (Adenovirus F) и ротавирусов группы А (Rotavirus A), норовирусов 1-2 генотипа (Norovirus 1, 2 генотип) и астровирусов (Astrovirus), диарогенных E.coli.
Данное письмо разработано на основании методических указания «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности» МУ 1.3.2569-09, Москва, 2009.
Забор материала, его предварительная обработка, хранение и перевозка, передача исследуемого материала в другие организации осуществляется согласно инструктивно-методическим документам, регламентирующим выполнение исследований для каждого вида возбудителя инфекций, инструкциям к наборам реагентов и в соответствии с СП 1.2.036-95, СП 1.3.3118-13 и СП 1.3.2322-08.
Осуществлять взятие клинического материала, строго следуя инструкции, только стерильными одноразовыми инструментами в стерильные одноразовые флаконы, пробирки, контейнеры. Работать в одноразовых перчатках. Сразу после взятия плотно закрывать пробирки, флаконы с клиническим материалом, не касаясь их внутренней поверхности и внутренней поверхности крышек. При переносе клинического материала из пробирок, флаконов в новые использовать только отдельные одноразовые стерильные наконечники с аэрозольными барьерами. При работе с клиническим материалом, открывая пробирки, флаконы, не производить резких движений и не допускать разбрызгиваний и расплескиваний, что может привести к контаминации проб и рабочих поверхностей.
Требования к забору биологического материала Используют пробы фекалий массой (объемом) примерно 1.3 г (1.3 мл). Исследование мазков неинформативно из-за низкого содержания в них возбудителей. Пробу в количестве 1 г (примерно) отдельным наконечником с фильтром или одноразовыми лопатками переносят в специальный стерильный флакон. Перевозку материала (предварительно обработанных проб) для исследования, а также его хранение осуществляют в соответствии с СП 1.2.036-95 в закрывающихся (с возможностью опломбирования) металлических или пластмассовых контейнерах, на дне которых размещают адсорбирующий материал (марлевая салфетка, ткань, вата и пр.), смоченный раствором дезинфицирующего средства. Контейнер помещают в сумку-холодильник или во внешний термоконтейнер с хладагентами. При соблюдении противоэпидемического режима возможна перевозка материала для исследования в металлическом термосе со льдом. Перевозку и хранение материала рекомендуется осуществлять в условиях "холодовой цепи" с обеспечением необходимого контроля установленного температурного режима при помощи термоиндикаторов.
Условия хранения и перевозки материала и предварительно обработанных проб. Образцы нативных фекалий: - при комнатной температуре — в течение 6 часов; - при температуре 2.8 °С — в течение 3 суток. Фекальная суспензия с глицерином, бактериальная фракция и осветленный фекальный экстракт: - при температуре минус 20 °С — в течение 1 недели; - при температуре минус 70 °С — длительно.
Пробы с направлениями доставляются в отделение особо опасных и вирусных инфекций МБЛ ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в Вологодской области с 8-30 до 15 часов (кроме субботы и воскресения). Адрес: город Вологда, улица Яшина, дом 1-а,вход со двора,2 подъезд,3 этаж телефон 75-50-31 врач-вирусолог Зорина Дарья Михайловна врач-бактериолог: Евсюкова Надежда Александровна
|